什么是T载体?T载体分为哪几类?有什么区别?

什么是T载体?T载体分为哪几类?有什么区别?

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T载体又称T-vector.聚合酶链反应产物的克隆运载体,线性化后两侧3′端各多出一个脱氧胸苷酸(T).由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A),与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率.

T载体是一种克隆载体,也就是用于在受体细胞中进行目的基因扩增的载体,它不能大量表达.多用于克隆PCR产物,一般用一些常见的载体改造成的,一般的DNA聚合酶没有3'-5'核酸外切酶活性,即酶的校正活性,在PCR产物3'末端以非模板依靠方式加上一个腺苷酸残基（A）,这样PCR产物的3'腺苷酸可和T-载体的3'胸腺嘧啶 互补,T-载体系统进行有效连接的基础正是这种碱基配对作用.相反,有校正活性的聚合酶将移去这个3' 突出端,产生平端PCR产物,这种产物不能直接用T-载体系统进行克隆.

假如想要一PCR扩增基因的产物大量表达,常见的方法是先将PCR产物连入T载体扩增（所用T载体需事先设计好酶切位点）,再用相应酶切下目的片段,然后连入以同样酶切处理后的表达载体大量表达蛋白质.

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